O presente estudo teve como objetivo principal identificar o efeito da cultura organizacional - mensurada pelos valores e práticas organizacionais - sobre as experiências positivas e negativas do bem-estar no trabalho, através do suporte organizacional e coping. Para tanto, foram utilizadas as escalas de experiências positivas e negativas no trabalho; instrumento brasileiro de avaliação da cultura organizacional; escala de percepção de suporte organizacional e escala de coping. Participaram da pesquisa os funcionários de uma empresa estatal federal no Brasil. Esta investigação adotou regressão padrão e hierárquica de análise classificados como qualitativos e quantitativos. Os resultados indicaram que o suporte organizacional como variável organizacional possui efeito mediacional, o que não ocorreu com as variáveis individuais, como coping. Em relação ao modelo de preditores, este estudo abordou variáveis individuais e organizacionais que ainda não haviam sido relacionadas com o bem-estar no trabalho. Outra contribuição importante que esse estudo trouxe foi a aplicação dos métodos de Baron & Kenny com o de Hayes & Preacher numa mesma amostra.