Withania somnifera Dunal (Ashwagandha) ist eine indische Heilpflanze mit bedeutenden pharmakologischen Eigenschaften wie adaptogenen, antioxidativen, hypoglykämischen und schlaganfallhemmenden Wirkungen. Mehrere ihrer Chemotypen umfassen NMITLI-101, NMITLI-118, NMITLI-128. Die vorliegende Arbeit befasst sich mit phytochemischen und analytischen Studien zu NMITLI118RT+, einem Arzneimittelkandidaten unter dem Dach des CSIR (abgeleitet von einem neuen Chemotyp von W. somnifera). Hier berichten wir über die Entwicklung, Validierung und Anwendung einer einfachen, schnellen und zuverlässigen isokratischen HPLC-Methode zur Quantifizierung von Withanolid A in NMITLI118RT+ auf einer CN-Säule unter Verwendung von Gliclazid als internem Standard, mit der Withanolid A in etwa 3,8 Minuten und Gliclazid (interner Standard) in etwa 4,8 Minuten mit einem Linearitätsbereich von 2-20 µg/ml nachgewiesen werden konnte. Eine zweite Methode berichtet hier über die Entwicklung und Validierung einer einfachen isokratischen Methode für die gleichzeitige Schätzung von Withanolid A und Withanon (Sesquiterpenlacton-Marker), die auf einer C-18; 3µ-Säule etabliert wurde und Withanolid A und Withanon bei Retentionszeiten von etwa 20,7 min bzw. 21,6 min im Linearitätsbereich von 2-50 µg/mL für beide nachweisen konnte.