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La aparición de nuevas betalactamasas, como la betalactamasa de espectro extendido (ESBL) y la betalactamasa metaloide (MBL), es un mecanismo importante por el que las bacterias patógenas desarrollan resistencia a los betalactámicos. Esto es motivo de preocupación mundial, ya que se sabe que dificultan el tratamiento de las infecciones relacionadas con bacterias. El objetivo de esta investigación era determinar fenotípicamente la presencia de bacterias Gram negativas productoras de ESBL y MBL a partir de aislados clínicos. Se detectaron ESBL en el 7,5% de Escherichia coli y en el 33,3% de Klebsiella pneumoniae. Ninguno de los aislados de P. aeruginosa de nuestro estudio mostró producción de BLEE por el método de la prueba de sinergia de doble disco (DDST). La prueba de potenciación en disco detectó MBL en el 12,5% de los aislados de E. coli, el 15,4% de Klebsiella pneumoniae y el 10% de P. aeruginosa, mientras que la prueba de Hodges modificada también detectó MBL en el 12,5% de los aislados de Escherichia coli, el 7,7% de Klebsiella pneumoniae y el 15% de Pseudomonas aeruginosa. Nuestro estudio revela que las bacterias Gram negativas de origen clínico producen ESBL y MBL. La detección de ESBL y MBL es crucial, ya que ayudará a los médicos a prescribir la terapia adecuada para los pacientes afectados. El uso racional de los antibióticos es vital para controlar los microbios resistentes.