La souche naturelle Bacillus subtilis ATCC 6633 produit un large éventail d'antibiotiques et de biosurfactants. Parmi ces familles de composés, certaines sont synthétisées par une voie originale et non ribosomique: les surfactines et les mycosubtilines. Dans ce travail, l'étude de l'activité biologique des mycosubtilines a d'abord confirmé l'étendue du spectre d'action antifongique puis révélé celui prometteur de certaines isoformes. Une étude des paramètres environnementaux a ensuite permis d'identifier les conditions de culture permettant d'orienter le métabolisme cellulaire vers la biosynthèse de l'isoforme la plus active. Plusieurs gènes impliqués dans des voies métaboliques centrales (ybgE, leuS, bfmBAA, ilvBNCleuABCD) ainsi que des gènes codant pour les régulateurs de ces voies ont été révélés en transcriptomique. La productivité de la biosynthèse a finalement pu être améliorée en combinant l'utilisation d'un dérivé d'ATCC 6633 surproducteur de mycosubtiline avec la mise au point d'un mode de culture débordant en bioréacteur. Des applications visant les industries des biopesticides ou de la cosmétique sont envisageables dans un futur proche.