La presente investigación se realizó en hatos lecheros del suroccidente de Pasto. Los objetivos del trabajo fueron aislar e identificar los microorganismos causantes de mastitis subclínica y determinar su sensibilidad a diferentes tipos de antibióticos, previamente seleccionados. Se tomaron muestras de leche en 120 vacas escogidas al azar en diez hatos visitados, utilizando el reactivo de California Mastitis Test (CMT). De las primeras 63 vacas positivas, se tomaron aproximadamente 20 centímetros cúbicos de leche en tubos estériles y se llevaron al laboratorio para aislar e identificar los microorganismos causantes de mastitis subclínica y posteriormente establecer su sensibilidad a los siguientes antibióticos: eritromicina, ofloxacilina, trimetropin-sulfa, cloranfenicol y penicilina. La investigación se realizó durante los meses de abril y mayo de 1.997. Los microorganismos con mayor prevalencia para la presente investigación fueron : Staphvlococcus aureus y Staphylococcus epidermidis.. mientras que la mayor sensibilidad se presentó a los antibióticos ofloxacilina, kanamicina y eritromicina.