Clonagem de genes de degradação do óleo
Clonagem do gene alkBde Pseudomonas aeruginosa associado à biodegradação de hidrocarbonetos
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Uma nova bactéria foi projectada com um sistema de expressão eficaz para melhorar a sua capacidade de degradar o petróleo em ambientes contaminados. Foram utilizadas técnicas de cultura de enriquecimento com petróleo bruto como única fonte de carbono para isolar microrganismos. Dezassete isolados bacterianos foram identificados utilizando testes bioquímicos e sequenciação do gene 16S rRNA. Os géneros identificados incluíram Acinetobacter, Pseudomonas, Aeromonas, Micrococcus, Achromobacter, Enterobacter, Klebsiella, Staphylococcus, Bacillus, Exiguobacterium, Brevibacillus e Stenotrop...
Uma nova bactéria foi projectada com um sistema de expressão eficaz para melhorar a sua capacidade de degradar o petróleo em ambientes contaminados. Foram utilizadas técnicas de cultura de enriquecimento com petróleo bruto como única fonte de carbono para isolar microrganismos. Dezassete isolados bacterianos foram identificados utilizando testes bioquímicos e sequenciação do gene 16S rRNA. Os géneros identificados incluíram Acinetobacter, Pseudomonas, Aeromonas, Micrococcus, Achromobacter, Enterobacter, Klebsiella, Staphylococcus, Bacillus, Exiguobacterium, Brevibacillus e Stenotrophomonas. Foi concebido um iniciador específico para amplificar o gene alkB, confirmando a sua presença em Pseudomonas aeruginosa. A cura do plasmídeo confirmou a presença do gene no cromossoma. O gene alkBfoi clonado num vetor plasmídico, transformado em E. coli e confirmado por PCR. A expressão do gene foi verificada e a sua contribuição para a eficiência da biodegradação foi testada utilizando o n-hexadecano como substrato. A eficiência de biodegradação aumentou de 32,63% para 77,42% após 72 horas, indicando uma melhoria de 44,8%. As estratégias de amplificação e clonagem de genes foram simuladas utilizando o software SnapGene. Este estudo é o primeiro do seu género no Iraque.
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