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El objetivo principal del presente trabajo es el cribado de bacterias biosurfactantes productoras de hidrocarbonoclastos procedentes de las aguas de producción de petróleo del yacimiento de Sidi LITAYEM. El cribado permitió aislar dos cepas bacterianas B17 y S7 con gran capacidad para producir biosurfactantes en dos fuentes de carbono diferentes (aceite de oliva y aceite de motor). Estos resultados se confirmaron mediante mediciones de los porcentajes de actividad emulsionante y de los diámetros de desplazamiento del aceite. En efecto, los biotensioactivos producidos por las cepas B17 y S7 obtuvieron E24 del orden del 44% y 33% y diámetros iguales a 5,4 y 5 cm respectivamente. El estudio de la estabilidad de los biosurfactantes frente a la temperatura, el pH y la salinidad, mostró que el biosurfactante B17 es más estable a temperaturas elevadas de hasta 100 °C y resultó ser resistente a la hipersalinidad (100 g/L) y a la acidez del medio (pH = 4). El estudio de la actividad biológica reveló que los biosurfactantes B17 y S7 tienen una actividad antibacteriana relativamente buena contra las diferentes cepas patógenas y fitopatógenas ensayadas, con MICs de 4,993 m