In diesem Band wird Ihnen das Grundlagenwissen sowie Tipps und Tricks für den Umgang mit Nucleinsäuren präsentiert. Sie werden sofort merken, dass der Autor Lust und Frust der täglichen Laborroutine genau kennt.
Aus dem Inhalt:
- Präparieren, Fällen, Konzentrieren und Reinigen von Nucleinsäuren
- Das molekularbiologische Handwerkszeug (Restriktionsenzyme, Gele, Blotten)
- PCR (Polymerase-Kettenreaktion)
- RNA-Isolierung, -Transkription
- Klonierung von DNA-Fragmenten
- DNA-Nachweis und -Analyse (Markierung von Sonden, Hybridisierung, Screening, Sequenzierung)
- Funktion von DNA-Sequenzen (Mutagenese, In-vitro-Translation, transgene Mäuse, Transgenexpression, Gentherapie, Genomik)
- Lieferantenverzeichnis.
Dieses Laborhilfsbuch zeigt Auswege aus experimentellen Sackgassen und weckt ein Gespür für das richtige Experiment zur rechten Zeit. Die eingestreuten Faust-Zitate mögen Sie trösten, wenn Sie sich in stillen Momenten der Selbsterkenntnis fragen, warum Sie das alles überhaupt tun.
Die 5. Auflage wurde aktualisiert und um Abschnitte zu den Themen Elektrophorese, fluoreszierende Proteine und Karriereplanung in der Wissenschaft ergänzt.
"In Summa: Fachlich hervorragend. Gibt Denkanstöße. Hat Spannung. Reißt einen mit. Und lachen kann man auch. Was will man mehr?" (Buch-Journal)
Inhaltsverzeichnis:
1 Was ist denn "Molekularbiologie", bitteschön?
1.1 Das Substrat der Molekularbiologie, oder: Molli-World für Anfänger
1.2 Was brauche ich zum Arbeiten?
1.3 Sicherheit im Labor
2 Einige grundlegenden Methoden
2.1 Nucleinsäure ist gleich Nucleinsäure und auch wieder nicht
2.2 Vom Fällen und Konzentrieren von Nucleinsäuren
2.3 Die Reinigung von Nucleinsäuren
2.4 Konzentrationsbestimmung von Nucleinsäure-lösungen
2.5 Methoden zur DNA-Präparation
3 Das Werkzeug
3.1 Restriktionsenzyme
3.2 Gele
3.3 Blotten
4 Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
4.1 Die Standard-PCR
4.2 Tips zur Verbesserung der PCR
4.3 PCR-Anwendungen
5 RNA
5.1 Methoden der RNA-Isolierung
5.2 Methoden der mRNA-Isolierung
5.3 Reverse Transkription (cDNA-Synthese)
5.4 In-vitro-Transkription (RNA-Synthese)
6 Die Klonierung von DNA-Fragmenten
6.1 Die Grundlagen des Klonierens
6.2 Mit welchen Vektoren klonieren?
6.3 Welche Bakterien?
6.4 Herstellen kompetenter Zellen und Transformation
6.5 Probleme beim Klonieren
6.6 Die Lagerung von Klonen
7 Wie man DNA aufspürt
7.1 Herstellung von Sonden
7.2 Hybridisierung
7.3 Nachweis der markierten DNA
7.4 Screenen von rekombinanten DNA-Banken
7.5 Two-hybrid system
8 DNA-Analyse
8.1 Sequenzierung
8.2 Methoden zur Analyse von DNA auf Mutationen
9 Untersuchung der Funktion von DNA-Sequenzen
9.1 Untersuchung der Transkription in Geweben
9.2 Mutagenese
9.3 in-vitro-Translation
9.4 Expressionssysteme
9.5 Transgene Mäuse
9.6 Regulation der Transgenexpression
9.7 Gentherapie
9.8 Genomik
10 Der Computer und Du
11 Zu guter Letzt
12 Karriereplanung
13 Anhang
13.1 Nützliche Tabellen
13.2 Standardlösungen
13.3 Glossar
14 Wer, was, wo?
14.1 Lieferanten / Adressen
14.2 Literatur
Aus dem Inhalt:
- Präparieren, Fällen, Konzentrieren und Reinigen von Nucleinsäuren
- Das molekularbiologische Handwerkszeug (Restriktionsenzyme, Gele, Blotten)
- PCR (Polymerase-Kettenreaktion)
- RNA-Isolierung, -Transkription
- Klonierung von DNA-Fragmenten
- DNA-Nachweis und -Analyse (Markierung von Sonden, Hybridisierung, Screening, Sequenzierung)
- Funktion von DNA-Sequenzen (Mutagenese, In-vitro-Translation, transgene Mäuse, Transgenexpression, Gentherapie, Genomik)
- Lieferantenverzeichnis.
Dieses Laborhilfsbuch zeigt Auswege aus experimentellen Sackgassen und weckt ein Gespür für das richtige Experiment zur rechten Zeit. Die eingestreuten Faust-Zitate mögen Sie trösten, wenn Sie sich in stillen Momenten der Selbsterkenntnis fragen, warum Sie das alles überhaupt tun.
Die 5. Auflage wurde aktualisiert und um Abschnitte zu den Themen Elektrophorese, fluoreszierende Proteine und Karriereplanung in der Wissenschaft ergänzt.
"In Summa: Fachlich hervorragend. Gibt Denkanstöße. Hat Spannung. Reißt einen mit. Und lachen kann man auch. Was will man mehr?" (Buch-Journal)
Inhaltsverzeichnis:
1 Was ist denn "Molekularbiologie", bitteschön?
1.1 Das Substrat der Molekularbiologie, oder: Molli-World für Anfänger
1.2 Was brauche ich zum Arbeiten?
1.3 Sicherheit im Labor
2 Einige grundlegenden Methoden
2.1 Nucleinsäure ist gleich Nucleinsäure und auch wieder nicht
2.2 Vom Fällen und Konzentrieren von Nucleinsäuren
2.3 Die Reinigung von Nucleinsäuren
2.4 Konzentrationsbestimmung von Nucleinsäure-lösungen
2.5 Methoden zur DNA-Präparation
3 Das Werkzeug
3.1 Restriktionsenzyme
3.2 Gele
3.3 Blotten
4 Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
4.1 Die Standard-PCR
4.2 Tips zur Verbesserung der PCR
4.3 PCR-Anwendungen
5 RNA
5.1 Methoden der RNA-Isolierung
5.2 Methoden der mRNA-Isolierung
5.3 Reverse Transkription (cDNA-Synthese)
5.4 In-vitro-Transkription (RNA-Synthese)
6 Die Klonierung von DNA-Fragmenten
6.1 Die Grundlagen des Klonierens
6.2 Mit welchen Vektoren klonieren?
6.3 Welche Bakterien?
6.4 Herstellen kompetenter Zellen und Transformation
6.5 Probleme beim Klonieren
6.6 Die Lagerung von Klonen
7 Wie man DNA aufspürt
7.1 Herstellung von Sonden
7.2 Hybridisierung
7.3 Nachweis der markierten DNA
7.4 Screenen von rekombinanten DNA-Banken
7.5 Two-hybrid system
8 DNA-Analyse
8.1 Sequenzierung
8.2 Methoden zur Analyse von DNA auf Mutationen
9 Untersuchung der Funktion von DNA-Sequenzen
9.1 Untersuchung der Transkription in Geweben
9.2 Mutagenese
9.3 in-vitro-Translation
9.4 Expressionssysteme
9.5 Transgene Mäuse
9.6 Regulation der Transgenexpression
9.7 Gentherapie
9.8 Genomik
10 Der Computer und Du
11 Zu guter Letzt
12 Karriereplanung
13 Anhang
13.1 Nützliche Tabellen
13.2 Standardlösungen
13.3 Glossar
14 Wer, was, wo?
14.1 Lieferanten / Adressen
14.2 Literatur