Die überarbeitete und aktualisierte 5. Auflage dieses Buches gibt Ihnen einen Überblick über die Methoden in Proteinbiochemie und Proteomics. Das Buch ist jedoch mehr als eine Methodensammlung: Es zeigt Auswege aus experimentellen Sackgassen und weckt ein Gespür für das richtige Experiment zur richtigen Zeit. Dies in klarem knappem Deutsch.
Inhaltsverzeichnis:
Behandelt werden klassische Verfahren wie Säulenchromatographie, HPLC, Elektrophoresen, Blots, Elisas, Ligandenbindungstests, die Herstellung von Antikörpern, das Solubilisieren von Membranproteinen, die Analyse von Glykoproteinen usw. Das Buch beschränkt sich nicht auf die Standardverfahren, die jeder kennt. Es gibt Ihnen einen Vorteil, indem es auch auf ausgefallene Methoden hinweist, mit denen sich spezielle Probleme lösen lassen. Einen großen Raum nehmen die modernen Verfahren ein: Massenspektrometrie, Proteomics und thermische Analyse. In der 5. Auflage wurden besonders das Kapitel Proteomics und darin die Angaben zur Massenspektrometrie überarbeitet und erweitert.
Es wird Ihnen auffallen, dass der Autor Lust und Frust der Laborroutine kennt. Die eingestreuten Don Quichotte Sprüche und der lockere Stil des Autors werden Ihnen über die Tiefpunkte des manchmal rauen Forscheralltags hinweghelfen.
Inhaltsverzeichnis:
Vorwort
Danksagung
Abkürzungen
Das Konzept des Experimentators
1 Das tägliche Brot
1.1 Puffer herstellen
1.2 Protein bestimmen
1.3 Gele
1.4 Gele färben
1.5 Fällen und Konzentrieren
1.6 Blotten
1.7 Autoradiographie von Gelen und Blots
2 Ligandenbindung
2.1 Radioaktive Ligandenmarkierung
2.2 Bindung
2.3 Auswerung von Bindungsdaten
2.4 Vernetzen von Liganden
2.5 Sinniges
3 Membranproteine solubilisieren
3.1 Seifen
3.2 Solubilisieren
4 Proteinnachweis durch Funktionsmessung
4.1 Translokatoren
4.2 Rekonstitution
4.3 Fluxtest
4.4 Aufbauende Überlegungen
5 Säubern und Putzen
5.1 Putziges
5.2 Konventionelle Reinigungsmethoden
5.3 Affinitätschromatographie
5.4 Die Reinheitsprobe
5.5 Ausschlachten
6 Antikörper
6.1 Herstellung von polyklonalen Antikörpern
6.2 Immunpräzipitation
6.3 Immunoaffinitätschromatographie
6.4 Antikörper gegen ungereinigte Proteine
6.5 Immunologische Nachweistechniken
7 Proteomics
7.1 Einführung
7.2 Probennahme
7.3 2D-Gelelektrophorese
7.4 Proteine spalten
7.5 Massenspektrometrie von Proteinen und Peptiden
7.6 Proteinchips
7.7 Aussterbende Dinosaurier?
7.8 Proteomics-Philosophie
8 Untereinheiten
8.1 Stöchiometrie & Merigkeit
8.2 Was unsere Welt im Innersten zusammenhält
9 Glykoproteine
9.1 Wie, wo und wozu werden Proteine glykosiliert?
9.2 Nachweis von Glykoproteinen in Gelen
9.3 Nachweis von Glykoproteinen auf Blots
9.4 Deglykosilierung
9.5 Die Zuckerketten
10 Der Schatz im Silbersee
10.1 Vom Paper
10.2 Vom Schreiben eines Papers
11 Durch die Wüste
12 Unter Geiern
12.1 Lieferanten
12.2 Lieferanten gegliedert nach Produkten
Das Letzte
Register
Inhaltsverzeichnis:
Behandelt werden klassische Verfahren wie Säulenchromatographie, HPLC, Elektrophoresen, Blots, Elisas, Ligandenbindungstests, die Herstellung von Antikörpern, das Solubilisieren von Membranproteinen, die Analyse von Glykoproteinen usw. Das Buch beschränkt sich nicht auf die Standardverfahren, die jeder kennt. Es gibt Ihnen einen Vorteil, indem es auch auf ausgefallene Methoden hinweist, mit denen sich spezielle Probleme lösen lassen. Einen großen Raum nehmen die modernen Verfahren ein: Massenspektrometrie, Proteomics und thermische Analyse. In der 5. Auflage wurden besonders das Kapitel Proteomics und darin die Angaben zur Massenspektrometrie überarbeitet und erweitert.
Es wird Ihnen auffallen, dass der Autor Lust und Frust der Laborroutine kennt. Die eingestreuten Don Quichotte Sprüche und der lockere Stil des Autors werden Ihnen über die Tiefpunkte des manchmal rauen Forscheralltags hinweghelfen.
Inhaltsverzeichnis:
Vorwort
Danksagung
Abkürzungen
Das Konzept des Experimentators
1 Das tägliche Brot
1.1 Puffer herstellen
1.2 Protein bestimmen
1.3 Gele
1.4 Gele färben
1.5 Fällen und Konzentrieren
1.6 Blotten
1.7 Autoradiographie von Gelen und Blots
2 Ligandenbindung
2.1 Radioaktive Ligandenmarkierung
2.2 Bindung
2.3 Auswerung von Bindungsdaten
2.4 Vernetzen von Liganden
2.5 Sinniges
3 Membranproteine solubilisieren
3.1 Seifen
3.2 Solubilisieren
4 Proteinnachweis durch Funktionsmessung
4.1 Translokatoren
4.2 Rekonstitution
4.3 Fluxtest
4.4 Aufbauende Überlegungen
5 Säubern und Putzen
5.1 Putziges
5.2 Konventionelle Reinigungsmethoden
5.3 Affinitätschromatographie
5.4 Die Reinheitsprobe
5.5 Ausschlachten
6 Antikörper
6.1 Herstellung von polyklonalen Antikörpern
6.2 Immunpräzipitation
6.3 Immunoaffinitätschromatographie
6.4 Antikörper gegen ungereinigte Proteine
6.5 Immunologische Nachweistechniken
7 Proteomics
7.1 Einführung
7.2 Probennahme
7.3 2D-Gelelektrophorese
7.4 Proteine spalten
7.5 Massenspektrometrie von Proteinen und Peptiden
7.6 Proteinchips
7.7 Aussterbende Dinosaurier?
7.8 Proteomics-Philosophie
8 Untereinheiten
8.1 Stöchiometrie & Merigkeit
8.2 Was unsere Welt im Innersten zusammenhält
9 Glykoproteine
9.1 Wie, wo und wozu werden Proteine glykosiliert?
9.2 Nachweis von Glykoproteinen in Gelen
9.3 Nachweis von Glykoproteinen auf Blots
9.4 Deglykosilierung
9.5 Die Zuckerketten
10 Der Schatz im Silbersee
10.1 Vom Paper
10.2 Vom Schreiben eines Papers
11 Durch die Wüste
12 Unter Geiern
12.1 Lieferanten
12.2 Lieferanten gegliedert nach Produkten
Das Letzte
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