Desarrollo de un biorreactor de hepatocitos tipo sándwich de gel de colágeno
Detección in vitro de hepatotoxicidad causada por fármacos y productos químicos
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Comprender la hepatotoxicidad de los fármacos es fundamental para el progreso de la investigación académica e industrial. Estudiar la hepatotoxicidad in vitro es un desafío porque los hepatocitos, las células metabólicamente activas del hígado, son muy difíciles de mantener en cultivo. Se ha observado que el cultivo de hepatocitos entre dos capas de colágeno mantiene una morfología similar a la in vivo y también muchas enzimas metabolizadoras de fármacos durante semanas. A pesar de la investigación que examina el metabolismo de los fármacos en los sándwiches de colágeno, existe...
Comprender la hepatotoxicidad de los fármacos es fundamental para el progreso de la investigación académica e industrial. Estudiar la hepatotoxicidad in vitro es un desafío porque los hepatocitos, las células metabólicamente activas del hígado, son muy difíciles de mantener en cultivo. Se ha observado que el cultivo de hepatocitos entre dos capas de colágeno mantiene una morfología similar a la in vivo y también muchas enzimas metabolizadoras de fármacos durante semanas. A pesar de la investigación que examina el metabolismo de los fármacos en los sándwiches de colágeno, existen datos limitados sobre la aplicabilidad de este sistema a los estudios de hepatotoxicidad. Cultivamos hepatocitos primarios de rata en la configuración de sándwich de colágeno y optimizamos este sistema para estudios de hepatotoxicidad a largo plazo. Además, también examinamos el medio acondicionado de los hepatocitos para investigar el perfil de proteínas secretadas, que podría usarse potencialmente para encontrar biomarcadores de toxicidad. Nuestro análisis proteómico combinó la electroforesis en gel con Qstar LC-MS / MS, y pudimos identificar 493 proteínas. En resumen, hemos demostrado que el sándwich de colágeno es un sistema adecuado para estudios de hepatotoxicidad y análisis proteómico.
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