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A engenharia do genoma está prestes a atingir a sua idade de ouro. Novas e excitantes ferramentas estão a surgir e a acumular-se no seu arsenal. Depois das TALENs e do Zing-finger, está a chegar uma nova ferramenta que vale a pena acrescentar. A mais recente adição é o sistema CRISPR. Um sistema que foi descoberto pela primeira vez no Streptococcus thermophilus e cujo papel natural é a imunidade adaptativa específica da sequência contra ADN estranho em bactérias. No presente relatório, o sistema CRISPR Cas9, tipo II, é utilizado numa tentativa de anular o gene HPRT1 expresso em linfócitos como…mehr

Produktbeschreibung
A engenharia do genoma está prestes a atingir a sua idade de ouro. Novas e excitantes ferramentas estão a surgir e a acumular-se no seu arsenal. Depois das TALENs e do Zing-finger, está a chegar uma nova ferramenta que vale a pena acrescentar. A mais recente adição é o sistema CRISPR. Um sistema que foi descoberto pela primeira vez no Streptococcus thermophilus e cujo papel natural é a imunidade adaptativa específica da sequência contra ADN estranho em bactérias. No presente relatório, o sistema CRISPR Cas9, tipo II, é utilizado numa tentativa de anular o gene HPRT1 expresso em linfócitos como prova de conceito. O meio HAT em combinação com tioguanina é utilizado como meio de seleção, permitindo um método de rastreio de leitura rápido e simples. Para verificar se o evento de edição foi bem sucedido nas células de mamíferos, é utilizado um kit de deteção de clivagem de ADN em combinação com um ensaio enzimático.
Autorenporträt
Paris obteve um mestrado no Departamento de Biotecnologia do KTH Royal Institute of Technology, tendo realizado o seu projeto de mestrado no Karolinska Uni. Hospital Karolinska. Antes disso, obteve um mestrado e uma licenciatura em biologia aplicada na Universidade de Ioannina. Paris é atualmente estudante de doutoramento em engenharia genómica na Universidade de Manchester.