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El parásito Entamoeba histolytica es el agente etiológico de la amibiasis. Esta enfermedad es un problema de salud pública en México. la fase infectiva de E. histolytica es el quiste. En nuestro laboratorio se descubrió que E. histolytica, cuando se cultiva en condiciones axénicas en el medio PEHPS es capaz de formar estructuras semejantes a quistes pero con muchas formas con pared inmadura. En nuestro trabajo observamos que cuando el medio PEHPS se adiciona con sales del tipo bivalente (Mg+2, Mn+2 y Co+2) la resistencia al detergente aumenta y el contenido de quitina en estas estructuras se incrementa en más de 100 veces, con una calidad biológica baja. El objetivo de nuestro estudio fue diseñar un medio de cultivo que permitiera mejorar las ocndiciones biológicas de estos quistes. Se utilizo el método simplex para determinar los valores y concentraciones óptimas en el medio de cultivo de 11 factores químicos y 4 condiciones fisicoquímicas. Los factores analizados fueron; suero bovino,solución soluble de colesterol y lípidos, extracto de hígado y páncreas, vitaminas 109 de Diamond y diversas concentraciones de glucosa y metales divalentes.