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Este estudo foi realizado para compreender o efeito do fator de crescimento e diferenciação 9 (GDF-9) e hormônio folículo estimulante (FSH) sobre a sobrevivência, crescimento e esteroidogênese in vitro de folículos pré-natais (FOPA) caprinos após cultivo de 16 dias. Os fragmentos de córtex ovarianos foram cultivados em meio ¿-MEM+ na presença ou ausência de GDF-9 (200 ng/mL) e/ou FSH (50 ng/mL) adicionado durante a primeira (dia 0-8) e/ou segunda (dia 8-16) metade do período de cultivo. Os fragmentos não-cultivados (controle) e cultivados foram processados para avaliação histológica e ultraestrutural. Em conclusão, o presente estudo demonstrou que o GDF-9 é melhor que o FSH para a sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais caprinos. Além disso, um meio dinâmico contendo GDF-9 e FSH (GDF-9/FSH) manteve a integridade folicular e promoveu a ativação de folículos primordiais e crescimento folicular durante o cultivo in vitro de longa duração de folículos pré-antrais caprinos.