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Lo scopo di questo studio è stato quello di valutare i parametri di motilità e vitalità in vitro nella diluizione del crioprotettore dimetilformammide al 5% dopo lo scongelamento a concentrazioni del 2,5 e 1,25%, utilizzando due diluenti commerciali aggiunti allo sperma equino crioconservato. Dopo lo scongelamento, i campioni sono stati diluiti per mantenere le concentrazioni finali (2,5 e 1,25%) di crioprotettore, utilizzando due diluenti commerciali (FR4® e Botu-Crio®) a due tempi: iniziale (Ti) e finale (Tf). Sono stati utilizzati tredici diversi campioni di eiaculato di cinque stalloni di razza nazionale. I parametri di motilità sono stati analizzati al computer e l'integrità della membrana plasmatica mediante microscopia a epifluorescenza. Si è registrato un miglioramento dei parametri di motilità totale e progressiva degli spermatozoi al momento finale (P<0,05) con il diluente Botu-Crio® rispetto all'FR4®. Non vi è stata alcuna differenza, P>0,05, tra i trattamenti in termini di integrità della membrana plasmatica.