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El objetivo de este estudio era correlacionar la influencia de la actividad PON1 con los parámetros de evaluación del sistema de análisis de semen asistido por ordenador (CASA) y la viabilidad espermática del semen porcino in natura, así como investigar la expresión de PON1 (ARNm) en el tejido testicular y epididimario de sementales porcinos adultos. La fracción espermática (SF) mostró la mayor actividad PON1 y los machos 81, 80 y 79 (P<0,05) mostraron la mayor actividad PON1. Cuando el eyaculado se diluyó (1:1) mostró una reducción media del 44% en la actividad PON1. La actividad PON1 en la FE mostró una correlación positiva con la concentración espermática, DCL, VCL y IDNA (P<0,05) y mostró una correlación negativa para los parámetros STR y LIN evaluados por CASA. La expresión de ARNm sólo se observó para la porción corporal del epidídimo. La FE es la parte del eyaculado que más mostró actividad de PON1 y los parámetros DCL, VCL, STR y LIN, junto con la concentración y viabilidad espermática (integridad del ADN) son los que mostraron mayor asociación con la enzima. Por otra parte, la PON1 sólo se expresó (ARNm) en el cuerpo epididimario del semental porcino.