Luis Angulo Graterol

Extracção de ADN a partir de tecido epitelial de lesma

Comparação de diferentes métodos de extração de DNA genômico em lesmas de pragas(Molusca: Gastropoda)

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Produktbeschreibung

O objetivo da pesquisa foi comparar três protocolos: Extração com SDS; Extração com CTAB e 2¿-mercaptoetanol e Extração com SDS e proteinase K, para determinar o método mais adequado para obter DNA de alto peso molecular e pureza em tecido epitelial de lesma: subfoco Arion e Deroceras reticulatum. A concentração e pureza de DNA foram estimadas espectrofotometricamente (absorvância a 260 nm e relação Abs260/Abs280 nm). Foi utilizado um desenho completamente aleatório com seis réplicas. Diferenças significativas (p<0,01) foram detectadas para quantidade, concentração e pureza entre protocolos. O protocolo (SDS e proteinase K) permitiu obter DNA com maior peso molecular (2 514,90±291,56) e pureza (1,97±0,02). A qualidade do DNA de cada protocolo foi verificada por PCR-RAPD, observando-se pouca reprodutibilidade para o primer OPA-02 (protocolo SDS); enquanto nos outros métodos foram observados perfis de amplificação de alta resolução e bandas reprodutíveis. Recomenda-se a utilização do protocolo SDS e da proteinase K, para obter DNA genômico de alto peso molecular, qualidade e pureza em lesmas.

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Produktdetails

• Verlag: Edições Nosso Conhecimento
• Seitenzahl: 72
• Erscheinungstermin: 19. April 2021
• Portugiesisch
• Abmessung: 220mm x 150mm x 5mm
• Gewicht: 125g
• ISBN-13: 9786203638684
• ISBN-10: 6203638684
• Artikelnr.: 62069170

Autorenporträt

Dr. Luis Angulo Graterol. Biólogo, M.Sc. Mejoramiento de Plantas. Jefe Laboratorio de Genética Molecular.Profesor e Investigador del Departamento e Instituto de Genética, Facultad de Agronomía, Universidad Central de Venezuela. Autores:Guillermo Antonio Perichi Cabrera, MSc.Rosana Figueroa Ruíz, Ph.D.Luis Dinitri Castro Chacín, Lcdo.