Los murciélagos son el segundo grupo de mamíferos con mayor diversidad cuya importancia radica principalmente en sus funciones ecológicas dentro del ecosistema. En Pico San Juan, no existen estudios que comparen la composición de especies a diferentes rangos altitudinales. El objetivo del presente trabajo fue identificar y comparar las ensambles de murciélagos que se distribuyen a una escala altitudinal regional. El monitoreo se realizó por tres noches consecutivas durante el mes de septiembre del 2018 en tres rangos altitudinales: 600 m, 800 m, 1100 m, los cuales están localizados en el municipio de Cumanayagua, provincia de Cienfuegos, centro-sur de Cuba. Para la identificación de las especies de murciélagos se utilizó tres redes de niebla de 9 metros. Se identificaron 11 especies de murciélagos, pertenecientes a cuatro familias y 10 géneros, representando un 42,3% de la quiropterofauna para Cuba y el 57.9% para Guamuhaya. El gremio trófico mejor representado fue el de los insectívoros (6 especies). Se demostró que la riqueza de especies se ve influenciada por el gradiente altitudinal, el cual es el responsable de la heterogeneidad del paisaje, en el Pico San Juan.