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La hibridación de ácidos nucleicos es el proceso en el que dos cadenas simples de ADN o ARN (monocatenario) de diferentes fuentes biológicas, realizan la configuración de doble catenaria, basándose en la homología de secuencia contingente de las dos fuentes, dando lugar a híbridos ADN-ADN, ARN-ARN o ADN-ARN. En la técnica de genética molecular de hibridación del ADN, se permite que cadenas simples de ADN de dos especies diferentes se unan para formar dobles hélices híbridas. Estos segmentos híbridos de ADN pueden utilizarse para determinar el parentesco evolutivo de los organismos examinando la similitud o disimilitud de las secuencias de pares de bases de ADN. La técnica de hibridación del ADN se basa en dos principios: el primero, que las dobles cadenas de ADN se mantienen unidas por enlaces de hidrógeno entre pares de bases complementarias, y el segundo, que cuanto más emparentadas estén dos especies, mayor será el número de pares de bases complementarias en el ADN híbrido. En otras palabras, el grado de hibridación es proporcional al grado de similitud entre las moléculas de ADN de las dos especies.
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