Foi desenvolvido um imunossensor eletroquímico para o agente patogénico alimentar comum Escherichia coli O157:H7. Este novo imunossensor baseia-se no bionanocompósito híbrido PPy/AuNP/MWCNT/Chi modificado com elétrodo de grafite lápis (PGE). Esta plataforma de bionanocompósito híbrido foi modificada com anticorpo monoclonal anti-E. coli O157:H7. A plataforma bionanocompósita e o imunossensor preparados foram caracterizados por meio de voltametria cíclica (CV). Nas condições óptimas, os resultados mostraram que a ordem de seletividade preferencial do método é a espécie patogénica gram-negativa E. coli O157:H7. O limite de deteção foi de ¿30 cfu/mL. Resumidamente, foi desenvolvido um imunossensor eletroquímico de alta sensibilidade para a deteção específica da contaminação por E. coli O157:H7 com a utilização do ensaio em sanduíche avaliado neste estudo, oferecendo um meio fiável de quantificação da bactéria. Para as aplicações no controlo da qualidade e segurança alimentar, o nosso imunossensor mostrou reprodutibilidade e estabilidade.