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La melatonina es una indolamina derivada del aminoácido triptófano, producida en la glándula pineal y caracterizada por su capacidad para secuestrar especies reactivas del oxígeno (ROS). El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la suplementación de melatonina al diluyente Tris-Gema en la criopreservación de semen bovino. Se utilizaron 54 eyaculados de toros Guzerá. El semen se diluyó en TRIS-Gema con la adición de melatonina a las siguientes concentraciones experimentales: grupo control - 0¿M; Melatonina - 10¿M; Melatonina - 100¿M; Melatonina - 200¿M. A continuación, se introdujeron en pajuelas de 0,25mL y se criopreservaron. Tras la descongelación a 37°C durante 30 segundos, se analizaron las alícuotas para la prueba de resistencia térmica rápida (RTT), la integridad de la membrana plasmática (PM), el acrosoma (Ac), el potencial de membrana mitocondrial (MMP) y la cinética espermática. Se observó que los porcentajes de motilidad eran superiores (p<0,05) en los grupos control (27,21 + 15,93) y 10µM (23,07 + 15,24). Los diluyentes de los grupos control (75,31 + 28,86) y 10µM (75,26 + 26,44) no difirieron en cuanto a la integridad de la MP.