Les lipoprotéines de faible densité (LDL) sont responsables de l'effet cryoprotecteur du jaune d' uf (JO). Un dilueur à 6% LDL, donne après congélation décongélation, deux fois plus de spz mobiles par rapport au JO. La glutamine (Glut) + 6% LDL a été étudiée au cours de la congélation de la semence canine. 6% LDL + 20 mmol Glut donne le meilleur pourcentage de réveil des spz par rapport à 6% LDL seul ou le JO. Des tests de fertilité in vitro ont été réalisés pour évaluer la qualité du sperme dans les différents milieux 6% LDL + 20 mmol Glut, 6% LDL seul et JO: Hypo-osmotique, FITC/PSA, Acridine orange et le SPERMAC®. 6% LDL + 20 mmol Glut a été testée dans la réfrigération du sperme par rapport au JO. Le 6% LDL + 20 mmol Glut est meilleur par rapport au JO puisque 100% des éjaculats ont été conservés pendant 4 J et 50% pendant 7 J. L'intérêt de centrifuger ou non la semence et l'ajout de glycérol avant réfrigération ont été étudiés. Si l'éjaculat récupéré est contaminé par les phases urétrale et prostatique, la centrifugation est nécessaire. L'ajout de glycérol a un effet néfaste sur la réfrigération du sperme de chien.