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A busca por uma vida mais saudável amplia a comercialização de alimentos funcionais, que são aqueles alimentos que contêm substâncias ou nutrientes que forneça beneficio à saúde, seja como prevenção ou tratamento de doenças. De maneira geral, os alimentos funcionais são considerados promotores de saúde humana e podem estar associados com a diminuição dos riscos de algumas doenças crônicas. Dentre eles, destacam-se os probióticos, que são microrgasnimos vivos os quais trazem benefícios à saúde humana e animal. Neste trabalho estudou-se a formulação de meio de cultivo alternativo ao MRS, utilizando-se soro de leite e outros nutrientes avaliados. As técnicas envolveram cultivos de Lactobacillus acidophilus La 04 com diferentes formulações. Foram avaliados nutrientes tais como, minerais e fatores de crescimento, vitaminas e proteínas, através da formulação de meios complexos. Após os cultivos foram analisados aspectos como pH, acidez, contagem de células e açúcares consumidos.Dentre as diferentes formulações se destacaram aquelas que se utilizou 5 a 7,5% de soro de leite formulado com extrato de levedura (1,0 a 1,5%).