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Este estudo investigou o efeito dos métodos de ensino no desempenho académico de alunos do ensino misto e de alunos do sexo único na disciplina de biologia do ensino superior, utilizando uma conceção de investigação quase experimental. O tamanho da amostra foi de 323 alunos do segundo ciclo do ensino básico de 23 escolas secundárias nas áreas governamentais locais de Yenagoa e Ogbia, de uma população de 6.988 alunos do segundo ciclo do ensino básico que oferecem Biologia como disciplina na escola secundária do Estado de Bayelsa. Foram utilizadas uma pergunta de investigação e uma hipótese. O Guia sobre o Método de Ensino por Palestra, o Guia sobre o Método de Ensino por Discussão e o Guia sobre o Método de Ensino por Demonstração foram guias fiáveis e validados utilizados pelos professores sobre como utilizar os métodos de ensino. O Standardized Biology Achievement Test foi adotado como um instrumento fiável para a recolha de dados. Os resultados revelaram que não existe uma diferença significativa nas pontuações médias dos alunos do 2º ano de escolaridade em escolas de um só sexo e em escolas mistas ensinadas com o método de demonstração no desempenho académico em Biologia.