32,99 €
inkl. MwSt.
Versandkostenfrei*
Versandfertig in 6-10 Tagen
  • Broschiertes Buch

Eschericia coli jest cz¿sto u¿ywanym gospodarzem, poniewä u¿atwia ekspresj¿ biäek dzi¿ki swojej wzgl¿dnej prostocie, niedrogiej i szybkiej hodowli o du¿ej g¿sto¿ci, dobrze znanej genetyce i du¿ej liczbie dost¿pnych kompatybilnych narz¿dzi molekularnych. Zaobserwowano, ¿e znaczniki powinowactwa poprawiaj¿ wydajno¿¿ biäka, zapobiegaj¿ proteolizie i zwi¿kszaj¿ rozpuszczalno¿¿ in vivo. Oczyszczanie biäek ze znacznikiem his opiera si¿ na zastosowaniu chelatowanego jonu metalu jako liganda powinowactwa. Enterokinazy s¿ na ogó¿ stosowane do trawienia biäek fuzyjnych, poniewä rozszczepiaj¿ cel po…mehr

Produktbeschreibung
Eschericia coli jest cz¿sto u¿ywanym gospodarzem, poniewä u¿atwia ekspresj¿ biäek dzi¿ki swojej wzgl¿dnej prostocie, niedrogiej i szybkiej hodowli o du¿ej g¿sto¿ci, dobrze znanej genetyce i du¿ej liczbie dost¿pnych kompatybilnych narz¿dzi molekularnych. Zaobserwowano, ¿e znaczniki powinowactwa poprawiaj¿ wydajno¿¿ biäka, zapobiegaj¿ proteolizie i zwi¿kszaj¿ rozpuszczalno¿¿ in vivo. Oczyszczanie biäek ze znacznikiem his opiera si¿ na zastosowaniu chelatowanego jonu metalu jako liganda powinowactwa. Enterokinazy s¿ na ogó¿ stosowane do trawienia biäek fuzyjnych, poniewä rozszczepiaj¿ cel po stronie C-ko¿cowej sekwencji rozpoznawanej, umo¿liwiaj¿c cäkowite usuni¿cie sekwencji znaczników powinowactwa. Przeprowadzono badanie, w którym komórki E. coli poddano lizie za pomoc¿ ultrad¿wi¿ków w celu odzyskania rozpuszczalnego biäka fuzyjnego, a nast¿pnie przes¿czono przez filtracj¿ z przep¿ywem stycznym (TFF) przy u¿yciu modu¿u kasetowego z p¿ask¿ p¿ytk¿. Przefiltrowane biäko oczyszczono metod¿ chromatografii anionowymiennej, a nast¿pnie chromatografii pseudopowinowactwa. Biäko fuzyjne rozszczepiono przez trawienie rekombinowan¿ enterokinaz¿ w celu oddzielenia partnera fuzyjnego od biäka b¿d¿cego przedmiotem zainteresowania. Stwierdzono, ¿e cäkowity odzysk po¿¿danego biäka wyniós¿ 24,7%.
Autorenporträt
El señor E. SELVARAJAN Actualmente es investigador asociado en la Escuela de Biociencias y Tecnología, Universidad VIT, Vellore, Tamil Nadu, India.Su experiencia en biotecnología de alimentos.Su investigación se centra en la producción de leche sin lactosa.Después de su maestría en tecnología en biotecnología (Universidad SASTRA), trabajó en BIOZEEN como aprendiz patrocinado por DBT, India.