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A utilização efectiva da xilose pode aumentar significativamente a viabilidade da utilização do hidrolisado lenhinocelulósico para produzir 2,3-butanodiol (2,3-BD). As dificuldades anteriores na produção de 2,3-BD incluem o facto de a xilose de alta concentração não poder ser completamente convertida e a taxa de fermentação ser lenta. Este estudo investigou os efeitos do extrato de levedura, Na2EDTA e ácido acético na produção de 2,3-BD a partir de xilose. Verificou-se que a adição simultânea destes três componentes poderia melhorar significativamente a produção de 2,3-BD. As concentrações óptimas de extrato de levedura, Na2EDTA e ácido acético foram 35,2, 1,2 e 4,5 g/L, respetivamente. A concentração de 2,3-BD no meio optimizado atingiu 39,7 g/L após 48 h de fermentação em frasco agitado. O rácio de utilização da xilose e a concentração de 2,3-BD aumentaram para 99,0% e 42,7 g/L, respetivamente, após 48 h de fermentação em agitação. Além disso, o rendimento de 2,3-BD foi de 0,475 g/g, 95,0% do valor máximo teórico. Como os principais componentes do hidrolisado lignocelulósico são a glucose, a xilose e o ácido acético, os resultados deste estudo indicam a possibilidade de utilizar diretamente o hidrolisado para produzir eficazmente 2,3-BD.