Protocolo eficiente de purificación del ADN para la toma de huellas dactilares de la caña de azúcar
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La caña de azúcar (Saccharum officinarum L.) es uno de los principales cultivos del mundo. La caracterización molecular y la selección asistida por marcadores moleculares en el cultivo de la caña de azúcar podría ser un instrumento para mejorar este cultivo y contribuir a aumentar la producción de azúcar. Al igual que muchas otras especies vegetales, los tejidos de la caña de azúcar contienen altos niveles de polisacáridos y compuestos polifenólicos, que representan un importante problema de contaminación durante la purificación del ADN. Las altas concentraciones de polisacárid...
La caña de azúcar (Saccharum officinarum L.) es uno de los principales cultivos del mundo. La caracterización molecular y la selección asistida por marcadores moleculares en el cultivo de la caña de azúcar podría ser un instrumento para mejorar este cultivo y contribuir a aumentar la producción de azúcar. Al igual que muchas otras especies vegetales, los tejidos de la caña de azúcar contienen altos niveles de polisacáridos y compuestos polifenólicos, que representan un importante problema de contaminación durante la purificación del ADN. Las altas concentraciones de polisacáridos, que se copurifican con el ADN en extracciones normales de fenol-cloroformo y los polifenoles se unen covalentemente al ADN, lo que lo hace inútil para la mayoría de las aplicaciones de investigación. Un procedimiento de purificación de ADN rápido, eficiente y fácil para la caña de azúcar es una necesidad urgente en los programas de mapeo del genoma y de selección asistida por marcadores (MAS). En la presente investigación se desarrolló un método eficiente y fácil para el aislamiento de ADN de alta calidad del cilindro de meristemas en la caña de azúcar. Con el método desarrollado fue posible el aislamiento de ADN de alta calidad sin el uso de nitrógeno líquido, homogeneizador de tejidos y utilizando una simple microcentrífuga. El ADN aislado se realizó bien para la amplificación de la PCR y la toma de huellas dactilares de ADN utilizando marcadores RAPD.
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