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En los últimos años, la secuenciación de ADN de próxima generación ha surgido como una tecnología nueva y poderosa que permite una visión mucho más completa de los sistemas biológicos a nivel genético y, por lo tanto, más descubrimientos médicos. No hace mucho tiempo, el método Sanger para la secuenciación de ADN, considerado como secuenciación de ADN de primera generación, fue el caballo de batalla en la finalización del proyecto del genoma humano. El método de Sanger fue a menudo la mejor opción para la secuenciación, resecuenciación, genotipado y análisis de fragmentos de novo. Sin embargo, el alto costo y la baja velocidad del método Sanger presentaban un obstáculo para secuenciar un gran número de bases según fuera necesario en la era de la medicina personalizada. Para abordar estos inconvenientes, muchas empresas e investigadores han desarrollado con éxito métodos de "secuenciación de ADN de próxima generación", es decir, cualquier nuevo método de secuenciación con menor costo y mayor velocidad que no se base en el método de Sanger. En este capítulo, primero se presentará la tecnología de secuenciación de ADN de próxima generación y luego se hará una sinopsis de su aplicación en los descubrimientos médicos. El objetivo de este capítulo es animar a los lectores a familiarizarse con la tecnología de secuenciación de ADN de próxima generación.