Techniken für das Multielement-Labeling von Biomolekülen
Strategien für das Multielement-Labeling von Proteinen und Antikörpern für LA-ICP-MS Anwendungen in der Proteomik
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Die Massenspektrometrie mit induktiv gekoppeltem Plasma (ICP-MS) leistet aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit, ihrem weiten linearen Messbereich sowie der Fähigkeit zur Multielement-Analyse, einen großen Beitrag zur Lösung biochemischer und medizinischer Fragestellungen. ICP-MS, gekoppelt mit LC-Trenntechniken, sind mittlerweile etablierte Methoden für die Detektion von Heteroelementen in Biomolekülen wie Phosphor oder Schwefel. Dagegen ist die Multielement-Detektion über das Element-Labeling seltener. Der Schwerpunkt dieser Arbeit liegt in der Entwicklung von Methoden zum Multielement-L...
Die Massenspektrometrie mit induktiv gekoppeltem Plasma (ICP-MS) leistet aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit, ihrem weiten linearen Messbereich sowie der Fähigkeit zur Multielement-Analyse, einen großen Beitrag zur Lösung biochemischer und medizinischer Fragestellungen. ICP-MS, gekoppelt mit LC-Trenntechniken, sind mittlerweile etablierte Methoden für die Detektion von Heteroelementen in Biomolekülen wie Phosphor oder Schwefel. Dagegen ist die Multielement-Detektion über das Element-Labeling seltener. Der Schwerpunkt dieser Arbeit liegt in der Entwicklung von Methoden zum Multielement-Labeling von Proteinen und Antikörpern, so dass der simultane Nachweis, die Identifizierung und gegebenenfalls die Quantifizierung vieler Proteine mittels Laser Ablation ICP-MS möglich werden. Dazu wurden zwei Strategien verfolgt: 1. Das Labeling von Biomolekülen mit einem bifunktionellen Liganden und Lanthaniden. 2. Die Markierung von Biomolekülen mit Iod. Die Labelingverfahren wurden für die Anwendung in Westernblot-Immunoassays optimiert, so dass die Untersuchung vieler Parameter in einem Assay möglich wird (Multiplexing).
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