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La présente étude a été conçue dans le but de formuler des films de chitosane (CH) par réticulation avec du citrate de sodium (Nacit), du tripolyphosphate de sodium (NaTPP) ou du sulfate de chondroïtine (CS) qui seront capables de simuler la perméation in vitro d'un médicament polaire modèle, le 5-fluorouracile (5-FU), et d'un médicament non polaire, l'indométhacine (INDO), à travers l'épiderme de rat, de lapin ou d'humain. Un plan d'optimisation a été utilisé pour identifier et optimiser diverses variables de processus et de formulation ayant une influence significative (p<0,05) sur la perméation des deux médicaments à travers ces films. De plus, les résultats ont été évalués pour l'effet de la densité de réticulation sur la perméation in vitro en utilisant l'analyse spectroscopique d'absorption atomique pour le Na+, la DSC et l'analyse spectroscopique IR. La perméation in vitro du 5-FU et de l'INDO à travers des formulations optimisées de films réticulés avec du CH-NaTPP, du CH-Nacit ou du CH-CS s'est avérée comparable à celle obtenue à travers des feuilles épidermiques de rats, de lapins et d'humains. Ces résultats indiquent que ces films CH optimisés ont un potentiel pour être développés en tant que substitut aux feuilles épidermiques de cadavres animaux et humains pour des études préliminaires de perméation in vitro.