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Las bacterias gramnegativas son importantes agentes etiológicos de enfermedades en los cultivos agrícolas. La regulación de la virulencia de estos fitopatógenos suele estar mediada por el mecanismo de control de la expresión génica dependiente de la densidad de población, el quorum sensing. Así pues, el presente estudio pretendía evaluar el potencial de las actinobacterias endófitas (grampositivas) para inhibir este mecanismo en cultivos gramnegativos. Los aislados pertenecientes a las especies Microbacterium testaceum, Microbacterium phyllosphaerae y Rhodococcus erythropolis mostraron el mayor potencial de inhibición de la comunicación célula-célula. Este es el primer informe de M. phyllosphaerae con esta característica. Además, los perfiles genómicos de M. testaceum, la especie predominante entre las actinobacterias de este estudio, se analizaron mediante PFGE y revelaron un elevado polimorfismo entre los aislados. En este trabajo se demostró que las actinobacterias endofíticas pueden inhibir el quorum sensing de bacterias gramnegativas y, por tanto, ser útiles para el desarrollo de estrategias sostenibles de control de fitopatógenos.