Tsukune ist auf der Yokai-Akademie umringt von übernatürlichen Wesen und viel zu vielen Verehrerinnen. Ein ums andere Mal verursachen diese durch den Wettstreit um Tsukune komplettes Chaos. Als die Schwester der hübschen Vampirin Moka einen gefährlichen Spiegel in die Schule bringt, führt dies dazu, dass der Rosenkranz, der die Welt der Menschen und der Yokai trennt, beschädigt wird. Moka ersetzt ihn durch ihren eigenen Rosenkranz, wodurch allein ihr vampirisches Selbst zurückbleibt. Um die alte Moka wiederzubekommen, will Tsukune einen Ersatz herbeischaffen und setzt dafür sein Leben aufs Spiel
Studio Gonzo und Regisseur Takayuki Inagaki (Black Cat, Koharu Biyori) legen mit Rosario + Vampire Capu2 noch einen drauf! Die Zuschauer erwartet ein Bombardement an hübschen Monster-Mädchen, viel Fanservice und jede Menge Comedy.